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修護測試——復(fù)達客戶檢測案例

2021年12月27日,上海某大學(xué)電話咨詢我司相對于他們研發(fā)的化妝品修護的功效檢測


客戶背景


客戶是上海某大學(xué)技術(shù)人員。新研發(fā)的產(chǎn)品需要備案做個預(yù)實驗看下修護功效,希望我們協(xié)助測試


樣品名稱


護膚乳


解決方案


1.實驗材料:


1.1細胞系:人永生化角質(zhì)細胞


1.2培養(yǎng)基:含 10%胎牛血清(FBS)的 MEM 培養(yǎng)基,2-8℃保存 2 周


1.3 測試條件:溫度 37±0.5℃,濕度>90% ,5% CO2 濃度


1.4  溶液及對照:陰性對照組(NC):含 0.4%FBS 的 MEM 培養(yǎng)基陽性對照組(PC):含 10%FBS 的 MEM 培養(yǎng)基


待測物質(zhì)(TA):用 0.4%FBS 的 MEM 培養(yǎng)基稀釋至測試濃度


2.試驗步驟:


2.1細胞活性測試


2.1.1細胞常規(guī)培養(yǎng)。制備細胞懸液,將細胞懸液接種于 96 孔細胞培養(yǎng)板,培養(yǎng)。


2.1.2棄去孔中原培養(yǎng)液,每孔加入不同濃度的測試樣品,返回培養(yǎng)箱孵育。


2.1.3取出培養(yǎng)板,每孔加入MTT 溶液,培養(yǎng)箱孵育。去除孔中液體,每孔加入 DMSO,置于振蕩器振蕩后, 在酶標儀測定吸光度。


2.1.4數(shù)據(jù)分析:細胞活性以陰性對照組的細胞活性為 100%,計算各組相對細胞活性(Viability)。


2.2細胞遷移測試


2.2.1常規(guī)培養(yǎng)細胞,使用帶有 2 孔插入物的 24 孔細胞培養(yǎng)板,每孔接種,返回培養(yǎng)箱培養(yǎng)至細胞融合。


2.2.2小心用鑷子取出培養(yǎng)板中的培養(yǎng)插入物,培養(yǎng)插入物 2 孔之間形成一道平整的無細胞區(qū)域。用 PBS 清洗細胞層 3 次,去除脫落的細胞。


2.2.3每孔加入 1 mL 含不同濃度的測試樣品的培養(yǎng)液,同時在鏡下采集圖像,記為 0 h,標記所采集的位置。


2.2.4每隔 24 h,在所標記的相同位置,采集圖片,記為 24 h 和 48 h。


2.2.5數(shù)據(jù)分析:采用IPP 圖像分析軟件,分析每個圖像劃痕區(qū)域的面積,以 0 h 為 100%,計算相對面積。


3.試驗結(jié)果:


3.1細胞活性測試

修護測試.png

修護測試.png


經(jīng)由客戶同意后,篩選三個濃度作為后續(xù)功效實驗測試濃度。


3.2細胞遷移測試

修護測試.png

在 3.2 測試條件下,24 h 時,與陰性對照組相比,陽性對照組遷移修復(fù)的速率明顯加快(P<0.05);樣品組三個濃度均比陰性對照組遷移修復(fù)快(P<0.05)。48h 時,各組遷移面積基本修復(fù)完全。


客戶反饋


客戶對于測試結(jié)果和我們技術(shù)人員進行探討、我們相互研究并且給予了客戶原始平行數(shù)據(jù),誤差范圍。并且后續(xù)要求我們對其采集的樣品定期檢測。


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