豬肉檢測——復(fù)達(dá)客戶檢測案例
2022年3月2日,客服中心反饋個人客戶想知道自己家買的豬肉有沒有寄生蟲之類的東西,想確保食入的安全,從而進(jìn)行檢測。
客戶是個人客戶,想知道他們從市場中購買的豬肉是否有寄生蟲之類的東西,客戶發(fā)現(xiàn)豬肉里有異常,所以想檢測一下看有沒有問題。
豬肉
檢測樣品是否有寄生蟲之類的東西。
推薦客戶測試豬肉中是否有囊尾蚴成分,因為豬肉中常見的寄生蟲就是囊尾蚴。
方法和原理:
方法:熒光定量pcr法
原理:熒光定量PCR 所使用的熒光化學(xué)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。而熒光定量 PCR 的方法相應(yīng)的可分為特異類和非特異類兩類,特異性檢測方法是在PCR反應(yīng)中利用標(biāo)記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產(chǎn)物;而非特異性檢測方法是在在PCR反應(yīng)體系中,加入過量熒光染料,熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射出熒光信號。前者由于增加了探針的識別步驟,特異性更高,但后者則簡便易行。
非特異性SYBR Green I染料法:SYBR Green I是一種結(jié)合于所有dsDNA雙螺旋小溝區(qū)域的具有綠色激發(fā)波長的染料(結(jié)合示意圖),在游離狀態(tài)下,SYBR Green I發(fā)出微弱的熒光,但一旦與雙鏈DNA結(jié)合后,熒光大大增強(qiáng)(作用機(jī)理圖)。因此,SYBR Green I的熒光信號強(qiáng)度與雙鏈DNA的數(shù)量相關(guān),可以根據(jù)熒光信號檢測出PCR體系存在的雙鏈DNA數(shù)量。
特異性Taqman水解探針法:Taqman熒光定量技術(shù)是以Taqman熒光探針為基礎(chǔ),Taqman熒光探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個熒光發(fā)射基團(tuán)和一個熒光淬滅基團(tuán)。探針完整時,發(fā)射基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;
PCR擴(kuò)增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使熒光發(fā)射基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。從而實現(xiàn)定量。常用的熒光基團(tuán)是FAM, TET, VIC, HEX。
實驗結(jié)果
客戶對于測試結(jié)果和我們技術(shù)人員進(jìn)行探討、我們相互研究并且給客戶提供寶貴的意見。
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